YALEPIC^® mRNA转染试剂-LFMR

LFMR（μl）：mRNA(μg) 剂量可以在2:1和5:1μl 之间进行调整。

细胞密度过低导致细胞生长缓慢，对外来刺激变得较为敏感，使得转染毒性增高。细胞密度过高，会导致细胞发生接触抑制，加快细胞凋亡。细胞融合度达到60% - 70%时，转染可以取得较高的转染效率。可预实验优化细胞转染密度。

当转染体系中存在多聚阴离子聚合物时(例如：硫酸葡聚糖、肝素等)，转染将无法正常进行，因此应避免上述物质存在于细胞转染体系中。

应尽量使用适度传代接种的细胞系，并尽量在平行实验时保持细胞传代次数的一致性，同时需避免细胞培养时间过长。

可能是如下两个原因造成的：1）细胞状态不好，参看第4条进行优化。2）转染效率太高，毒性由高转染效率带来。可通过调整试剂和基因的比例来降低细胞毒性，适量减少转染试剂的用量，可以降低复合物颗粒表面过量的正电荷从而降低细胞毒性。转染效率高导致的细胞毒性大并不影响蛋白的生产，可以继续对蛋白产量进行监控。

转染效果稳定性取决于转染试剂的稳定性和基因的稳定性。转染试剂应按照说明书建议的保存温度及条件进行保存。基因如短时间内连续使用，可放置于4℃保存。若超过10天不使用，建议置于-20℃或-80℃长期储存以降低核酸的降解速度。